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環境計測のための機器分析法 茶山健二
3章 蛍光分析 物質を光らせる
3-8  応用
定性分析
 紫外線を照射したときの蛍光の有無や色調により,定性を行うことができます。とくに固体試料の場合には便利であり,表3・2は各種鉱物の例です。生体組織などの検査に蛍光額微鎮を用いることがあり,各種有機物の蛍光スペクトルも同定に利用されます。
表3・2 紫外線(253.7nm)下における各種鉱物の蛍光
鉱物化学式自然色蛍光色
方解石CaCo3白〜灰
灰重石CaWO4灰白白〜青
サファイアAl2O3黄〜赤
ケイ酸亜鉛鉱Zn2SiO4
ほたる石CaF2白など
ウラン鉱物*UO2+xなど
*直接またはフッ化ナトリウムと融解
定量分析
(i)  無機成分
 鉱石,金属,水など種々の試料に適用されますが,対象となる定量成分は吸光光度分析法ほど多くはありません。表3・3によく用いられる方法の槻要を示した。吸光光度法に比ベ1〜3けた感度がよく,0.01μg/ml程度の低濃度溶液についても定量可能で,特にレーザー励起蛍光測定装置を用いた場合には,pg/mlレベルの測定を行うことができます。N2レーザー励起-時間分解光子計数法を用いて,0.0008pg/mlのEu3+錯体,0.3pg/mlのSm3+錯体の蛍光スペクトルを測定した例があります。
表3・3 蛍光分析の応用例(無機)
元素試薬測定波長
(nm)
定量下限a)
(μg/ml)
pH溶媒b)
Alオキシン450〜6100.18〜8.5CHCl3
ポンタクロムブルーブラックR540〜7000.01
0.002
4.8H2O
C5H11OH
モーリン525〜5700.005

サリシリデン-o-アミノフェノール5050.0035
ルモガリオン5750.00015
Bベンゾイン4800.04>12H2O+C2H5OH
モーリン490〜5000.01
CH3COCH3
Beモーリン510〜6150.001>12H2O
2-メチルオキシン430〜6000.0018CHCl3
3-ヒドロキシ-2-ナフトン酸4600.00026〜9
Caカルセイン
0.1>12H2O
GaローダミンB5850.0056N HClC6H6
2-メチルオキシン4950.0023.9CHCl3
In2-メチルオキシン520
5.5CHCl3
MgN,N'-ビス-サリシリデン-2,3,ジアミノベンゾフラン5450.002

Se2,3-ジアミノナフタレン5200.00052C6H12
Snフラボノール4700.020.1〜0.5N
H2SO4
H2O+DMF
6-ニトロ-2-ナフチルアミン-8-スルホン酸(青)0.0004

Uフッ化ナトリウム(固体)5600.0001
固相
Zrモーリン5080.0011.8N
HCl

a) 測定装置によって異なるので,おおよその定量下限を示した。
b) 空欄は水溶液。
(ii)  有機成分
 各種有機工業製品,医薬品,生化学試料,食品,大気粉じん,水など非常に多方面の試料に適用されます。
 表3・4は,それらの応用例の一部です。この方法は大気粉じんや食品中のベンゾ〔a〕ピレン,アフラトキシンなどの発がん物質,フェニルケトン尿症の新生児の血液中のチロシン測定など,環境保全や病気の診断などに重要な役割を果し,無機成分同様極微量の測定に適しています。
 なお高速液体クロマトグラフ法の検出手段としてさかんに使われ,また薄層クロマトグラフ法などの分離手段と組み合わせても用いられています。
表3・4 蛍光分析の応用例(有機)
成分試薬*測定波長(nm)
励起蛍光
多環芳香族炭化水素
アントラセン-250〜370375〜450
フェナントレン-250〜285345〜385
ピレン-235〜330380〜395
ベンゾ〔a〕ピレン-295〜380400〜455
ペリレン-250〜430435〜500
アルデヒド・カルボン酸
ホルムアルデヒドアセチルアセトン+アンモニア410510
アクロレイン6-アミノ-1-ナフトールスルホン酸(J酸)470500
βインドール酢酸-278348
ピルビン酸4'-ヒドラジン-2-スチルバゾール450550
アミン
エピネフリンヘキサシアノ鉄(III)酸カリウム422529
セロトニン-295550
ヒスタミンo-フタルアルデヒド360450
クレアチンニンヒドリン390495
アミノ酸
フェニルアラニンジペプチド+ニンヒドリン365515
チロシン1-ニトロソ-2-ナフトール460570
トリプトファン-287348
ビタミン
A-325470
B1(サイアミン)ヘキサシアノ鉄(III)酸カリウムまたは臭素+チオシアン酸アンモニウム350〜400420〜500
B2(リボフラビン)-425〜475500〜530
C(アスコルビン酸)o-フェニレンジアミン350425
E(トコフェロール)-295340
糖類・ステロイド
グルコース5-ヒドロキシ-1-テトラロン470550
2-デオキシグルコース35-ジアミノ安息香酸"410495
コレステロール塩化亜鉛+アセチルクロリド525575
ハイドロコーチゾンブタノール+硫酸470630
医薬品
モルヒネヘキサシアノ鉄(III)酸カリウム250440
アスピリン(サチリル酸に分解)310400
ペニシリン2-メトキシ-6-クロロ-9-(β-アミノエチル)-アミノアクリジン420500
キニーネ-350450
食品添加物・かび毒
ズルチンレゾルシン+硫酸354546
デヒドロ酢酸ホウ酸+無水酢酸334365
アフラトキシン-365413〜450
*はそれ自身が蛍光性を示すもの
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